二硫键质谱分析

二硫键是蛋白内部半胱氨酸残基形成的蛋白翻译后修饰，这共价键的形成来自半管氨酸的自由巯基集团，主要是由酶催化形成，例如蛋白二硫键异构酶和内质网氧化还原酶-1，二硫键是蛋白结构中重要组成部分，确保蛋白适当折叠，保持稳定和正常发挥功能。

二硫键的作用

• 三级结构：二硫键确保蛋白正常的折叠；他们能够使蛋白形成正确的结构亚型，能够稳定更高级别的构象以确保能行使正常的生物功能。
• 四级结构：二硫键对蛋白行使正常功能起决定性作用，二硫键的还原能够引起某些蛋白活性的改变。

既然二硫键在生物体中如此重要，科研工作者们也需要更为高效的方法进行检测分析。有几种常用方法可以对二硫键进行定位，包括核磁共振，X射线晶体分析，Edman降解，以及大部分科研工作者采用的高效液相串联质谱方法。

AIMS提供的是高效专业的蛋白二硫键定位服务，有专业的HPLC-MS/MS质谱平台，可以分析各种真核生物和原核生物样本。

服务流程

二硫键分析前处理

• 用NEM进行自由巯基的还原烷基化处理
• 随后用IAM对断开的二硫键进行封闭
• 凝胶或溶液内酶解(depends on type of samples you send us)
• HPLC 分离, 随后进行MS/MS 分析
• 二硫键位点数据分析

二硫键分析酶切方式

注意：避免在样本准备过程中的二硫键自然生成。

• 2个半胱氨酸残基之间反应
• 1个半胱氨酸和1个二硫键之间反应
• 2个已经形成二硫键的半胱氨酸之间发生的反应

提示：温度，PH，和自由半胱氨酸残基都有可能影响真实结果。

服务优势

• 高精度及准确性：能准确确定二硫键肽位点，排除假阳性影响。
• 不同类型分析：可对不同的二硫键形成类型进行分析。
• 快速操作简单：前期处理简单，不需额外实验操作。

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谷胱甘肽化位点修饰