泛素化位点鉴定
*此项目适合进行蛋白泛素化位点初步定性，适合蛋白SDS-PAGE和蛋白溶液样本。
泛素化是分子功能强大的调节因子，通常情况下与蛋白的降解有关，也在蛋白分子细胞内定位、DNA损伤反应、突触小泡融合以及免疫和转录过程中起重要作用。需要降解的蛋白质再通过一系列酶级联反应后被标记上泛素标签。
下面是泛素化蛋白酶体系统（UPS）：
- 泛素被标记在底物上，随后发生一系列酶级联反应包括E1（泛素激活酶），E2（泛素结合酶），E3（泛素连接酶）；
- E1水解ATP之后形成泛素-腺嘌呤，介导后续反应形成硫酯键，并将泛素（Ub）传递给E2；
- 最后通过一系列反应将泛素（Ub）传递给酶底物，去泛素化酶（DUB）可以去除底物上的泛素标签并循环使用。
泛素的不同链接方式：
蛋白底物可以发生单一泛素化，多单泛素化，同型多聚泛素化和异型多聚泛素化。
- (A) 单一泛素化（Monoubiquitination）and 多单泛素化（multi-monoubiquitination）.
- (B) 同型多聚泛素化（Homotypic polyubiquitination）.泛素可以相互连接形成链，并连接在任意的其中7个赖氨酸残基上包括 (Lys6, Lys11, Lys27, Lys29, Lys33, Lys48, and Lys63) ,或者 Met1。在多聚泛素化过程中，还会有一些类泛素化的修饰集团参与，例如 SUMO, NEDD8, and ISG15.
- (C) 异型多聚泛素化（Heterotypic polyubiquitination）。在多聚反应过程中，通过在不同的泛素分子上发生不同的连接集团，可以形成一个混合的泛素化序列。每一个泛素上也可以发生几处修饰，产生分支多聚物。
泛素化位点的发现是诸多生物实验的核心，通常来讲赖氨酸残基突变为精氨酸，因为侧链亲质子性因此不能发生泛素化。大多数实验室通过利用经典WB技术和特异性泛素化抗体检测蛋白的泛素化位点，但因为抗体的特异性与敏感性等限制，质谱技术的发展使发现新的泛素化底物和特异泛素化位点成为可能。
AIMS提供的是高效专业的蛋白乙酰化鉴定服务，有专业的HPLC-MS/MS质谱平台，可以分析各种真核生物和原核生物样本。
服务流程
- 凝胶或溶液内酶解(depends on type of samples you send us)
- 修饰肽段富集 (optional; depends on the abundance of phosphor-peptide)
- HPLC 分离, 随后进行MS/MS 分析
- 甲基化位点数据分析
服务优势
- 高精度及准确性：能准确确定发生修饰的肽段及其修饰位点。
- 位点覆盖率高（可选）：质谱检测前可对泛素化修饰肽段进行富集。
- 多种修饰类型分析：可分析不同种类的聚泛素化类型。
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SUMO化位点修饰
