本页面是乙酰化「位点鉴定」服务入口。如果您已有明确的目标蛋白，需要精确定位其上的乙酰化修饰位点，请在此选择对应服务。如需在全蛋白水平进行系统性乙酰化分析，请访问 乙酰化蛋白质组学。
乙酰化修饰与蛋白活性调控紧密相关。大部分研究发现非组蛋白乙酰化发生在赖氨酸残基，这种修饰影响 mRNA 稳定性、蛋白定位、相互作用以及降解过程。这些非组蛋白乙酰化与肿瘤发生、癌细胞增殖、免疫效应密切相关。
乙酰化修饰主要分为两类：N-乙酰化（发生在蛋白 N 端）和赖氨酸乙酰化（发生在 Lys 残基的 ε-氨基上）。N-乙酰化是真核生物蛋白中最常见的修饰，约 85% 的哺乳动物蛋白和 60% 的酵母蛋白存在此修饰。赖氨酸乙酰化是一个可逆过程，在组蛋白和非组蛋白中均广泛存在，由乙酰基转移酶（HAT/KAT）催化、去乙酰化酶（HDAC/KDAC）去除。
乙酰化位点鉴定的核心目标是：在已知的特定蛋白上，精确鉴定乙酰化发生在哪一个氨基酸残基上，从而为后续的功能验证和机制研究提供分子水平的确凿证据。
N-乙酰化与赖氨酸乙酰化
蛋白乙酰化主要分为两大类，在连接位点和生物学功能上各有不同：
N-乙酰化
连接位点：蛋白 N 端氨基酸残基
常见底物：丝氨酸、丙氨酸、苏氨酸的 N 端残基
结构特征：共翻译修饰，由 N-乙酰转移酶（NAT）催化，不可逆
生物学功能：影响蛋白稳定性、亚细胞定位和蛋白-蛋白相互作用
典型蛋白：组蛋白 H4、β-淀粉样前体蛋白
NAT 催化不可逆共翻译修饰
赖氨酸乙酰化
连接位点：赖氨酸（Lys）残基的 ε-氨基
催化酶：乙酰基转移酶（HAT/KAT）
去修饰酶：去乙酰化酶（HDAC/KDAC/Sirtuin）
生物学功能：调控染色质结构、基因转录、蛋白互作及代谢调控
典型蛋白：组蛋白 H3/H4、p53、NF-κB、α-tubulin
HAT/KATHDAC可逆修饰表观遗传
技术方案
乙酰化位点鉴定针对特定目标蛋白，通过免疫亲和富集乙酰化肽段后进行 LC-MS/MS 分析，精确定位修饰位点。标准流程如下：
蛋白提取目标蛋白纯化/SDS-PAGE 分离
→
酶切消化凝胶或溶液内胰蛋白酶酶解
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肽段富集乙酰化肽段免疫亲和富集
→
LC-MS/MS高分辨质谱采集
→
位点定位乙酰化位点确认与定量
服务优势
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靶向精准
针对已知目标蛋白进行定向乙酰化分析，结果精确到具体氨基酸残基，直接服务于功能验证研究。
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N/赖氨酸同步覆盖
一次实验同时检测 N-乙酰化和赖氨酸乙酰化位点，全面覆盖两种主要乙酰化类型。
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富集增强灵敏度
可选乙酰化肽段免疫亲和富集，显著提高低丰度乙酰化位点的检测覆盖率。
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高分辨质谱平台
采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统，确保乙酰化肽段检测的灵敏度和位点定位精度。
送样要求
常规动物组织：100mg
软体动物组织：1g
常规植物组织：1g
植物果实及种子：2g-4g
细胞样本：2×107
菌类样本：150mg
最低蛋白质量：1mg
检测平台：Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统
位点鉴定因针对特定蛋白，样本量要求相对灵活，支持血清、重组蛋白等特殊样本，具体请咨询技术团队。
详细送样指南请参考 送样准备。
常见问题
乙酰化位点鉴定和乙酰化蛋白质组学有什么区别？
位点鉴定针对已知的特定目标蛋白，精准定位乙酰化发生在哪个氨基酸残基上，适用于已有明确研究目标的场景。蛋白质组学则在全蛋白水平进行系统性乙酰化分析，无需预设目标，适合探索性研究。简单来说：已知目标蛋白选位点鉴定，探索未知选蛋白质组学。
N-乙酰化和赖氨酸乙酰化有什么不同？
N-乙酰化发生在蛋白 N 端，是共翻译修饰，通常不可逆，约 85% 哺乳动物蛋白存在此修饰。赖氨酸乙酰化发生在 Lys 残基的 ε-氨基上，是可逆修饰，由 HAT/KAT 催化、HDAC 去除，在表观遗传调控中起核心作用。两者的分析策略不同，Aimsmass 可在一次实验中同步覆盖。
送样要求是什么？
常规动物组织 100mg，细胞样本 2×107 个，菌类样本 150mg，最低蛋白质量 1mg。位点鉴定因针对特定蛋白，样本量要求相对灵活，支持 SDS-PAGE 胶条和蛋白溶液样本。
项目周期多长？交付哪些内容？
标准交付周期约 1-2 周。交付内容包括：原始质谱数据（.raw）、乙酰化位点定位结果表（含位点置信度）、修饰肽段序列信息、关键质谱谱图。如需生信下游分析可另行沟通。
数据质量如何保证？
采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统。乙酰化修饰质量偏移为 +42.0106 Da（赖氨酸），通过高分辨 MS/MS 谱图确认修饰位点，位点定位置信度（localization probability）≥ 0.75。
相关服务
如需在全蛋白水平进行系统性乙酰化分析，或对其他修饰类型进行研究，可参考以下服务：
