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蛋白棕榈酰化(准确地说是蛋白质S-酰基化)是指脂肪酰部分,通常是16-碳棕榈酰部分,对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。本产品是一种基于生物素酰基替换法原理,并能结合WB技术快速检测全蛋白棕榈酰修饰位点的检测试剂盒。产品中含有配套使用的各种缓冲液,无需再进行其他复杂特定试剂的配置。
棕榈酰化蛋白鉴定方法的突破基于点击化学和酰基生物素交换的两种非放射性方法的发展。这些技术为各种细胞和组织中基于质谱的蛋白质棕榈酰化的高通量蛋白质组学分析拓宽了道路。
注意:本试剂盒(AM10315)为基础版,不含Streptavidin-HRP检测试剂,用户需自备Streptavidin-HRP及化学发光底物。如需含HRP的完整版,请选择 AM10316。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 酰基-生物素交换(ABE)技术 |
| 主要应用 | 全蛋白水平的S-棕榈酰化修饰检测,无需靶蛋白免疫沉淀 |
| 检测方法 | 免疫印迹法(Western Blot) |
| 结果读取 | 需自备Streptavidin-HRP及化学发光底物 |
| 样本类型 | 细胞、组织等全蛋白提取物 |
| 保存条件 | 参见组分表;不同组分储存条件不同 |
| 运输条件 | 冰袋运输,确保试剂稳定性 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积/数量 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer | Solution I | 10 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 1800 μL | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 100 μL | 4℃/-20℃ |
| Diluting Buffer | Solution IV | 10 mL | 4℃ |
| +HAM Buffer | Solution V | 1000 μL | 4℃ |
| -HAM Buffer | Solution VI | 1000 μL | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 100 μL | 4℃/-20℃ |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积/数量 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer | Solution I | 2 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 360 μL | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 20 μL | 4℃/-20℃ |
| Diluting Buffer | Solution IV | 2 mL | 4℃ |
| +HAM Buffer | Solution V | 200 μL | 4℃ |
| -HAM Buffer | Solution VI | 200 μL | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 20 μL | 4℃/-20℃ |
* 本试剂盒不含Streptavidin-HRP,请用户自备。
AM10315为基础版试剂盒,不含Streptavidin-HRP检测试剂,用户需自备Streptavidin-HRP及化学发光底物进行Western Blot检测;AM10316(含HRP版)已包含Streptavidin-HRP,开箱即用。两款试剂盒的ABE反应组分(裂解、封闭、还原、标记等)完全相同。
Total protein-ABE试剂盒用于检测全蛋白水平的棕榈酰化修饰,无需先进行免疫沉淀;而IP-ABE试剂盒需要先对特定靶蛋白进行免疫沉淀富集。Total protein-ABE适用于高通量筛查,IP-ABE适用于目标蛋白的验证研究。
不同组分保存条件不同:LB Buffer、Diluting Buffer、HAM Buffer需4℃保存;Reducing Reagent、Blocking Reagent、BMCC Buffer需-20℃保存。建议收到后按组分表要求储存,避免反复冻融。