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Total Protein Myristoylation Detection Kit For WB 全蛋白豆蔻酰免疫印迹法试剂盒
AM10115豆蔻酰修饰检测试剂盒

Total Protein Myristoylation Detection Kit For WB 全蛋白豆蔻酰免疫印迹法试剂盒

基于点击化学原理,结合免疫印迹技术,实现全蛋白水平豆蔻酰化修饰检测的试剂盒

产品亮点

点击化学特异性标记豆蔻酰化蛋白支持 NMT 活性研究适配 WB 和质谱分析
货号规格价格(CNY)操作
AM101154rxns¥2688
AM1011520rxns¥8288
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产品概述

肉豆蔻酰化是一种14-碳的饱和脂肪酸,肉豆蔻酸,附着在一个真核蛋白质亚群的N端甘氨酸上。虽然经常被称为蛋白翻译后修饰PTM,但它通常发生共翻译,当核糖体聚合不到100个残基时,并在去掉领头的蛋氨酸之后发生甲硫氨酸氨基肽酶的残留物,暴露N端甘氨酸。催化肉豆蔻酸转移的酶是肉豆蔻酰基辅酶a:N-肉豆蔻酰基转移酶(NMT)。肉豆蔻酰辅酶a底物首先与载脂蛋白酶结合,引起构象变化,从而允许肽底物结合。N端甘氨酸胺攻击肉豆蔻酰基辅酶a (myr-CoA)硫酯,通过亲核取代进行化学转化;先释放CoA产物,再释放肉豆蔻酰基化肽。

本产品是一种基于点击化学原理,并能结合WB技术快速检测全蛋白豆蔻酰修饰的检测试剂盒。产品中含有配套使用的各种缓冲液,无需再进行其他复杂特定试剂的配置。

技术参数

参数规格
检测原理点击化学结合生物素-链霉亲和素系统
主要应用全蛋白水平豆蔻酰化修饰检测
检测方法免疫印迹法(Western Blot)
检测系统Streptavidin-HRP化学发光检测
样本类型活体细胞(需先进行探针标记)
保存条件大部分组分4℃保存,Strepdavidin-HRP需-20℃保存
运输条件冰袋运输,确保试剂活性

试剂盒组分

组分列表(20次反应)

试剂名称(20次反应)试剂编号体积储存温度
Probe reaction bufferSolution I240 μL4℃
Lysis BufferSolution II8 mL4℃
CUAAC click labeling BufferSolution III400 μL4℃
Blocking ReagentSolution IV340 μL4℃
Strepdavidin-HRPSolution V40 μL-20℃

组分列表(4次反应)

试剂名称(4次反应)试剂编号体积储存温度
Probe reaction bufferSolution I60 μL4℃
Lysis BufferSolution II1600 μL4℃
CUAAC click labeling BufferSolution III80 μL4℃
Blocking ReagentSolution IV80 μL4℃
Strepdavidin-HRPSolution V40 μL-20℃

实验流程

探针标记 活细胞特异性探针标记
细胞裂解 制备蛋白样品
生物素标记 CUAAC点击化学反应
检测分析 Streptavidin-HRP WB检测

实验案例

常见问题

该试剂盒的检测原理是什么?

本试剂盒基于点击化学原理,通过特异性探针对活细胞中的豆蔻酰化蛋白进行标记,然后通过生物素-链霉亲和素系统进行Western Blot检测。主要流程包括:探针标记→细胞裂解→生物素标记→Streptavidin-HRP检测。

该试剂盒检测的是全蛋白还是目标蛋白?

本试剂盒设计用于检测全蛋白水平的豆蔻酰化修饰,可以同时检测样本中所有发生豆蔻酰化修饰的蛋白质,适用于全局性豆蔻酰化修饰谱的分析。

试剂盒应该如何保存?

试剂盒不同组分保存条件不同:大部分缓冲液需4℃保存,Strepdavidin-HRP需-20℃保存。具体保存条件请参考试剂盒组分表中的详细说明。建议收到后按说明储存,避免反复冻融。

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