抗体药物修饰分析服务 | 糖基化/翻译后修饰

经过 30 多年的快速发展，抗体的生产已成为当今世界生物制药行业最核心的领域。附着在蛋白质上的多糖可分为三种类型：N-联糖基化、O-联糖基化和糖胺聚糖。其中 N-联糖基化是最常见且对药物质量影响最大的修饰类型。

糖基化修饰在众多翻译后修饰中对药代动力学至关重要。IgG 抗体 Fc 段的糖型组成直接影响抗体依赖细胞介导的细胞毒性 (ADCC) 和补体依赖的细胞毒性 (CDC) 效应，因此糖基化检测对于抗体药物功能研究和质量控制具有重要意义。

分析策略

高分辨质谱直接分析完整抗体的分子量分布，获取整体糖型信息。可快速评估主要糖型组成和批次间差异。

胰蛋白酶消化后进行 LC-MS/MS 分析，同时获得肽段序列和糖基化信息，精确定位糖基化位点并鉴定各_site_的糖型组成。

PNGase F 酶解释放 N-糖链，经 2-AB 或 RapiFluor-MS 标记后进行 HILIC-UPLC 或 CE-LIF 分析，获取详细糖型定量数据。

HCD/ETD/CID 多种碎裂方式，全面覆盖糖肽和糖链结构信息。

优化的分析流程，从样品接收到报告交付约 1-2 周。

同位素标记内标和多重技术验证，确保糖型定量的准确性和可重复性。

IgG 抗体的 Fc 段 N-糖基化直接影响 ADCC、CDC 效应和半衰期。糖型组成（如岩藻糖、半乳糖、唾液酸含量）的变化可能导致药效和安全性问题。ICH Q6B 要求对抗体的糖基化谱进行详细表征。

三个层次：①完整糖蛋白水平——完整分子量分析；②糖肽水平——酶切后糖肽的 LC-MS 分析，确定糖基化位点和糖型；③释放糖水平——PNGase F 释放 N-糖后经 2-AB 标记的 HILIC-HPLC 或 CE 分析。

氧化（甲硫氨酸、色氨酸）、脱酰胺（天冬酰胺、谷氨酰胺）、焦谷氨酸化（N 端）、C 端赖氨酸截短、糖化（非酶促糖基化）等。这些修饰可能影响药物稳定性和免疫原性，需要在质量表征中评估。