TMAO 定量分析概述
氧化三甲胺(Trimethylamine N-oxide, TMAO)是肠道菌群代谢膳食磷脂酰胆碱、左旋肉碱、甜菜碱等营养素产生的三甲胺(TMA),在肝脏黄素单加氧酶 3(FMO3)催化下氧化生成的代谢产物。近年来大量流行病学和实验研究表明,血浆 TMAO 水平升高与动脉粥样硬化、心力衰竭、慢性肾病等心血管代谢疾病的风险显著正相关。[1]
TMAO 作为心血管疾病的独立风险标志物,其准确定量对于临床风险评估、营养干预效果评价和肠道微生态研究具有重要价值。Aimsmass 基于专业的 LC-MS/MS 三重四极杆质谱平台,采用同位素内标法,可实现 TMAO 及其前体物质(胆碱、肉碱、甜菜碱等)的同时定量检测。[2]
TMAO 定量分析的研究价值
心血管疾病风险评估
血浆 TMAO 水平与动脉粥样硬化、心肌梗死、心力衰竭的风险呈正相关。TMAO 定量检测可作为心血管事件风险分层的辅助指标,为精准医学提供代谢组学证据。[3]
肠道微生态研究
TMAO 的生成直接依赖肠道菌群对胆碱/肉碱的代谢能力。TMAO 及其前体的联合检测可反映肠道菌群-宿主代谢互作状态,是微生态研究的重要代谢标志物。
营养干预评价
膳食干预(如减少红肉摄入、补充益生菌)可降低 TMAO 水平。TMAO 定量检测可用于评价营养干预方案的有效性,为个性化营养指导提供客观依据。
检测靶标
| 分析物 | 英文名 | 检测方法 |
|---|---|---|
| TMAO | Trimethylamine N-oxide | LC-MS/MS (MRM) |
| 胆碱 | Choline | LC-MS/MS (MRM) |
| 甜菜碱 | Betaine | LC-MS/MS (MRM) |
| 肌酐 | Creatinine | LC-MS/MS (MRM) |
| 左旋肉碱 | L-Carnitine | LC-MS/MS (MRM) |
技术平台
采用 Thermo Fisher TSQ Quantis / TSQ Altis 三重四极杆质谱仪,搭配 EASY-nLC 1200 液相色谱系统。MRM 多反应监测模式,同位素内标法定量,线性范围 0.1-1000 ng/mL,检测灵敏度达 pg 级别。
标准检测流程
样本前处理:根据样本类型采用优化的提取方案(蛋白沉淀、液液萃取或固相萃取),确保目标代谢物的回收率和稳定性。
色谱分离:选择适合目标代谢物极性的色谱柱和流动相体系,梯度洗脱实现良好分离,正/负离子切换覆盖更多化合物。
质谱检测:三重四极杆 MRM 模式,同位素内标法定量。多组分同时监测,一次进样完成所有目标物的定性和定量。
数据分析与报告:专业软件处理原始数据,内标校正定量,输出代谢物浓度表、质控报告和统计分析结果。
送样要求
| 样本类型 | 推荐送样量 | 最低送样量 |
|---|---|---|
| 血浆/血清 | 200μL | 50μL |
| 组织 | 200mg | 50mg |
| 细胞 | 2×107 个 | 5×106 个 |
| 尿液 | 1-5mL | 500μL |
| 粪便 | 200mg | 50mg |
* 样本需 -80°C 保存,干冰运输。具体要求请参考送样指南,或联系技术支持获取定制化送样方案。
开启您的靶向代谢物研究
提交咨询,Aimsmass 技术团队将根据您的课题定制检测方案和报价。
获取定制方案与报价 查看全部靶向代谢物服务相关代谢物分析服务
参考文献
- Tian X, et al. Chemical isotope labeling for quantitative proteomics. Mass Spectrom Rev. 2021;42(2):546-576. DOI:10.1002/mas.21709 方法学,定量
- Sivanich MK, et al. Recent advances in isobaric labeling and applications in quantitative proteomics. PROTEOMICS. 2022;22(19-20):2100256. DOI:10.1002/pmic.202100256 综述,TMT
- Louca S, et al. Advances in data-independent acquisition mass spectrometry towards comprehensive digital proteome landscape. Mass Spectrom Rev. 2023;42(6):2324-2348. DOI:10.1002/mas.21781 DIA
- Li J, et al. Data-independent acquisition (DIA): an emerging proteomics technology for analysis of drug-metabolizing enzymes. Drug Discov Today Technol. 2021;39:49-56. DOI:10.1016/j.ddtec.2021.06.006 综述
常见问题
TMAO 定量检测适合哪些样本类型?
适用于血浆/血清、尿液、组织匀浆、粪便等多种生物样本。血浆样本推荐 EDTA 抗凝管采集,避免溶血。粪便样本可反映肠道菌群 TMA 生成能力。
检测方法的灵敏度如何?
基于 LC-MS/MS 三重四极杆 MRM 模式,采用同位素内标法定量,检测灵敏度达 pg 级别,线性范围 0.1-1000 ng/mL,可满足临床样本的低丰度检测需求。
一次实验可以同时检测哪些指标?
标准面板同时检测 TMAO、胆碱、甜菜碱、肌酐、左旋肉碱 5 个指标。可根据需求定制扩展面板,增加 3-甲基组氨酸、1-甲基组氨酸、牛磺酸等相关代谢物。
送样量要求是多少?
血浆/血清 200μL(最低 50μL),组织 200mg(最低 50mg),细胞 2×10⁷ 个(最低 5×10⁶ 个)。样本需 -80°C 保存,干冰运输。
项目周期多长?
从收到合格样本到交付数据分析报告,常规周期为 2-3 周。包含样本前处理、LC-MS/MS 采集、定量分析和报告编制等环节。
