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衣康酸是由顺式-乌头酸脱羧酶 (ACOD1,也称为 IRG1 和 CAD)催化反应,使顺式-乌头酸脱羧生成,该酶是一种由免疫反应基因 1 ( irg1 ) 编码的线粒体基质酶。顺式-乌头酸是 TCA 循环中的临时中间体,因此通常不出现在 TCA 循环的 8 个不同步骤中。
衣康酸是免疫代谢中的重要代谢物,可对目标蛋白进行翻译后修饰,影响蛋白功能。近年来研究发现衣康酸化修饰在固有免疫应答中发挥关键调控作用。
目标蛋白衣康酸检测试剂盒(细胞标记)AM10217是针对多数研究细胞内蛋白衣康酸修饰位点检测所开发的专业试剂盒。本产品基于点击化学(CUAAC)标记技术,通过对细胞裂解后蛋白进行特异性位点标记,再利用免疫印迹方法实现对目标蛋白衣康酸修饰位点的高灵敏度检测。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 点击化学(CUAAC)标记技术 |
| 主要应用 | 细胞内目标蛋白衣康酸修饰位点检测 |
| 检测方法 | 免疫印迹法(Western Blot) |
| 结果读取 | 链霉亲和素-HRP(Streptavidin-HRP)化学发光检测 |
| 样本类型 | 细胞裂解液 |
| 保存条件 | 参见组分表;不同组分4℃或-20℃保存 |
| 运输条件 | 冰袋运输,确保试剂稳定性 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Probe reaction buffer(探针反应缓冲液) | Solution I | 240 μL | 4℃ |
| Lysis Buffer(裂解缓冲液) | Solution II | 4 mL | 4℃ |
| CUAAC click labeling Buffer(点击化学标记缓冲液) | Solution III | 400 μL | 4℃ |
| Blocking Buffer(封闭缓冲液) | Solution V | 340 μL | 4℃/-20℃ |
| Streptavidin-Beads(链霉亲和素磁珠) | Solution VI | 1200 μL | 4℃ |
| 产品说明书 | 1份 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存温度 |
|---|---|---|---|
| Probe reaction buffer | Solution I | 60 μL | 4℃ |
| Lysis Buffer | Solution II | 800 μL | 4℃ |
| CUAAC click labeling Buffer | Solution III | 80 μL | 4℃ |
| Blocking Buffer | Solution V | 80 μL | 4℃/-20℃ |
| Streptavidin-Beads | Solution VI | 250 μL | 4℃ |
本试剂盒基于点击化学(CUAAC)标记技术,通过特异性探针标记衣康酸修饰的蛋白,然后利用生物素-链霉亲和素系统进行Western Blot检测。主要步骤包括:探针标记→细胞裂解→生物素标记→捕获→检测。
本试剂盒检测的是由顺式-乌头酸脱羧酶(ACOD1/IRG1)催化生成的衣康酸修饰。衣康酸是免疫代谢中的重要代谢物,可对目标蛋白进行翻译后修饰,影响蛋白功能。
不同组分保存条件不同:Solution I-III和VI需4℃保存;Solution V可4℃或-20℃保存。具体保存条件详见试剂盒组分表。建议收到后按说明书要求保存,避免反复冻融。