本页面是棕榈酰化「位点鉴定」服务入口。如果您已有明确的目标蛋白，需要精确定位其上的棕榈酰化修饰位点，请在此选择对应服务。如需在全蛋白水平进行系统性棕榈酰化分析，请访问 S-棕榈酰化蛋白质组学。
棕榈酸（C16:0）是长链饱和脂肪酸，在细胞膜形成、信号传导和能量储存中扮演重要角色。S-棕榈酰化是指棕榈酰链通过硫酯键连接在蛋白的半胱氨酸残基上，这种修饰影响蛋白的定位和功能。与其他脂质修饰不同，蛋白棕榈酰化是高度动态的，棕榈酰化和去棕榈酰化循环调控着蛋白的功能和定位。
S-棕榈酰化是一种特殊的蛋白 S-酰基化，类似于磷酸化和乙酰化等可逆翻译后修饰。除了 S-酰基化，棕榈酸也可连接到氨基酸的氨基上形成 N-棕榈酰化，或在丝氨酸/苏氨酸的羟基上形成 O-棕榈酰化。伴随 S-棕榈酰化，还会有 N-豆蔻酰化和 S-异戊二烯化等其他脂质修饰同时发生。
棕榈酰化位点鉴定的核心目标是：在已知的特定蛋白上，精确鉴定棕榈酰化发生在哪一个半胱氨酸残基上，从而为蛋白膜定位和信号调控研究提供确凿证据。
点击化学法与 ABE 生物素交换法
Aimsmass 提供两种主流的棕榈酰化位点鉴定技术路线，可根据研究需求选择：
点击化学法（Click Chemistry）
原理：使用棕榈酸类似物（如 17-ODYA）进行代谢标记，再通过点击化学反应连接生物素标签
优势：标记效率高，背景低，可检测动态棕榈酰化/去棕榈酰化事件
适用场景：活细胞标记、动态棕榈酰化研究、新位点发现
关键试剂：17-ODYA / Alk-C16 + CuAAC 点击反应
代谢标记点击化学活细胞适用
ABE 生物素交换法
原理：先烷基化封闭自由巯基，再用羟胺特异性切断棕榈酰硫酯键，暴露的巯基与生物素反应
优势：无需代谢标记，适用于冻存样本和临床样本
适用场景：临床组织样本、已冻存样本、无法进行代谢标记的场景
关键步骤：NEM 封闭 → NH2OH 切断 → Biotin-HPDP 标记
无需标记冻存样本临床适用
技术方案
棕榈酰化位点鉴定通过特异性标记和富集棕榈酰化肽段后进行 LC-MS/MS 分析，精确定位修饰位点。两种技术路线的标准流程如下：
蛋白标记点击化学标记或 ABE 生物素交换
→
亲和富集链霉亲和素珠富集修饰肽段
→
酶切消化胰蛋白酶肽段制备
→
LC-MS/MS高分辨质谱采集
→
位点定位棕榈酰化位点确认
点击化学法流程
- 代谢标记
使用棕榈酸类似物（17-ODYA）标记目标蛋白
- 点击反应
催化反应促使修饰蛋白带上生物素标签
- 亲和富集
链霉亲和素珠富集修饰肽段
- LC-MS/MS
高分辨质谱检测修饰位点
ABE 生物素交换法流程
- 巯基封闭
NEM 烷基化封闭自由巯基
- 去棕榈酰化
羟胺（NH2OH）特异性切断棕榈酰硫酯键
- 生物素标记
Biotin-HPDP 与暴露的巯基反应
- 亲和富集 + LC-MS/MS
链霉亲和素富集后进行质谱检测
服务优势
-
双技术路线覆盖
提供点击化学和 ABE 两种方法，分别适用于活细胞动态标记和冻存/临床样本，满足不同研究需求。
-
靶向精准
针对已知目标蛋白进行定向棕榈酰化分析，结果精确到具体半胱氨酸残基。
-
高灵敏度检测
采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统，获取更多肽段信息，发现更多修饰位点。
-
操作灵活
无需放射性同位素标记，实验流程简单，支持多种样本类型。
送样要求
常规动物组织：100mg
软体动物组织：1g
常规植物组织：1g
植物果实及种子：2g-4g
细胞样本：2×107
菌类样本：150mg
最低蛋白质量：1mg
检测平台：Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统
位点鉴定因针对特定蛋白，样本量要求相对灵活，支持血清、重组蛋白等特殊样本，具体请咨询技术团队。
详细送样指南请参考 送样准备。
常见问题
棕榈酰化位点鉴定和棕榈酰化蛋白质组学有什么区别？
位点鉴定针对已知的特定目标蛋白，精准定位棕榈酰化发生在哪个半胱氨酸残基上，适用于已有明确研究目标的场景。蛋白质组学则在全蛋白水平进行系统性棕榈酰化分析，无需预设目标，适合探索性研究。简单来说：已知目标蛋白选位点鉴定，探索未知选蛋白质组学。
点击化学法和 ABE 法应该如何选择？
点击化学法需要活细胞代谢标记，适合检测动态棕榈酰化事件和新位点发现，标记效率高。ABE 法无需代谢标记，适用于冻存样本和临床组织样本。如果您的样本是新鲜培养的细胞，推荐点击化学法；如果是冻存组织或临床样本，推荐 ABE 法。
送样要求是什么？
点击化学法需要提供新鲜培养的细胞（≥ 1×107），以便进行代谢标记。ABE 法可接受冻存组织（100mg）或细胞裂解液。两种方法均需设置未标记对照组。
项目周期多长？交付哪些内容？
标准交付周期约 1-2 周。交付内容包括：原始质谱数据（.raw）、棕榈酰化位点定位结果表、修饰肽段序列信息、关键质谱谱图。
数据质量如何保证？
采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统。棕榈酰化修饰（半胱氨酸）经标记后产生特征质量偏移，通过高分辨 MS/MS 谱图确认修饰位点。设置未标记对照排除假阳性。
相关服务
如需在全蛋白水平进行系统性棕榈酰化分析，或对其他修饰类型进行研究，可参考以下服务：
