本页面是S-异戊烯化「位点鉴定」服务入口。如果您已有明确的目标蛋白，需要精确定位其上的S-异戊烯化修饰位点，请在此选择对应服务。如需在全蛋白水平进行系统性S-异戊烯化分析，请访问 S-异戊烯化蛋白质组学。
S-异戊烯化是一种蛋白翻译后的脂质修饰，将法尼基（15-碳）或香叶基香叶基（20-碳）异戊二烯类脂链通过硫醚键连接到蛋白 C 末端或附近的半胱氨酸残基上。这种修饰赋予蛋白疏水性质，使其能够与细胞膜结合。
S-异戊烯化由两种酶催化：法尼基转移酶（FTase）以法尼基二磷酸（FPP）为底物，识别 CaaX 基序（C=半胱氨酸, a=脂肪族氨基酸, X=决定特异性的残基）；香叶基香叶基转移酶 I 型和 II 型（GGTase-I/II）以香叶基二磷酸（GGPP）为底物。S-异戊烯化蛋白中最大的一类是小 G 蛋白（Ras、Rho、Rab 家族），它们在癌症和微生物感染中起关键作用。
S-异戊烯化位点鉴定的核心目标是：在已知的特定蛋白上，精确鉴定异戊烯化修饰发生在哪一个半胱氨酸残基上，并区分法尼基化和香叶酰化。
法尼基化与香叶酰化
S-异戊烯化主要分为两种类型，由不同的酶催化，识别不同的基序：
法尼基化（Farnesylation）
脂链：法尼基（Farnesyl, 15-碳异戊二烯）
催化酶：法尼基转移酶（FTase）
识别基序：CaaX（X = Ser/Met/Gln/Ala）
生物学功能：Ras 蛋白膜定位、核纤层蛋白加工
典型底物：H-Ras、N-Ras、K-Ras、Lamin B
FTaseFPPCaaXRas
香叶酰化（Geranylgeranylation）
脂链：香叶基香叶基（Geranylgeranyl, 20-碳异戊二烯）
催化酶：GGTase-I（CaaX, X = Leu）/ GGTase-II（CC/CXC）
识别基序：CaaX（X = Leu）或 CC/CXC 基序
生物学功能：Rho/Rab 蛋白膜定位、囊泡运输
典型底物：RhoA、Rac1、Cdc42、Rab 家族
GGTaseGGPPCC/CXCRho/Rab
技术方案
S-异戊烯化位点鉴定通过化学报告基团（叠氮/炔基）标记策略，利用生物正交反应实现修饰蛋白的特异性检测和富集。标准流程如下：
代谢标记叠氮/炔基异戊二烯类似物标记
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点击化学生物正交反应连接生物素
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亲和富集链霉亲和素珠富集修饰蛋白/肽段
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LC-MS/MS高分辨质谱采集
→
位点定位异戊烯化位点确认
服务优势
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化学报告基团标记
采用叠氮/炔基异戊二烯类似物替代放射性底物，安全高效，灵敏度高，通过点击化学反应连接生物素或荧光基团。
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法尼基/香叶酰区分
通过使用不同的报告基团底物（Az-FPP vs Az-GGPP），可区分法尼基化和香叶酰化修饰。
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靶向精准
针对已知目标蛋白进行定向分析，结果精确到具体半胱氨酸残基。
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高分辨质谱平台
采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统，确保异戊烯化修饰肽段检测的灵敏度和位点定位精度。
送样要求
常规动物组织：100mg
软体动物组织：1g
常规植物组织：1g
植物果实及种子：2g-4g
细胞样本：2×107
菌类样本：150mg
最低蛋白质量：1mg
检测平台：Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪（分辨率 240,000 @ m/z 200，扫描速度 40 Hz），搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统
位点鉴定因针对特定蛋白，样本量要求相对灵活，支持血清、重组蛋白等特殊样本，具体请咨询技术团队。
详细送样指南请参考 送样准备。
常见问题
S-异戊烯化位点鉴定和异戊烯化蛋白质组学有什么区别？
位点鉴定针对已知的特定目标蛋白，精准定位异戊烯化发生在哪个半胱氨酸残基上。蛋白质组学则在全蛋白水平进行系统性分析。已知目标蛋白选位点鉴定，探索未知选蛋白质组学。
如何区分法尼基化和香叶酰化？
两种修饰的脂链长度不同（15-碳 vs 20-碳），可使用不同的叠氮标记底物（Az-FPP 或 Az-GGPP）分别进行代谢标记。质谱分析中，两种修饰的质量偏移也不同，可通过高分辨质谱区分。
送样要求是什么？
需要提供新鲜培养的细胞（≥ 1×107）进行代谢标记。也可提供纯化的目标蛋白进行体外异戊烯化反应。标记时间通常为 4-24 小时。
FTase 抑制剂（如 FTI-277）可以用来验证吗？
可以。FTase 抑制剂（FTI-277）可特异性抑制法尼基化，GGTase 抑制剂（GGTI-298）可特异性抑制香叶酰化。通过比较抑制剂处理前后的修饰水平，可验证异戊烯化类型和特异性。
项目周期多长？
标准交付周期约 1-2 周。交付内容包括：原始质谱数据、异戊烯化位点定位结果表、修饰肽段序列、关键质谱谱图。
相关服务
如需在全蛋白水平进行系统性S-异戊烯化分析，或对其他修饰类型进行研究，可参考以下服务：
