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AIMS 专业服务

氨基酸组成分析

氨基酸分析是药物发现各个阶段的一项重要生化技术,可用于测定蛋白质(多肽)药物的氨基酸组成和含量,是 ICH Q6B 规范的关键检测项目。

HPLC/LC-MS分析平台
18+氨基酸种类
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在制药工业中,氨基酸被用作治疗性蛋白、多肽和小分子药物的起始原材料。用于特定用途的氨基酸的质量和安全必须由适当的分析程序和测试来保证。氨基酸分析是 ICH Q6B 规范的关键检测项目之一。

最近氨基酸分析的趋势是分别使用 HILIC 或混合模式色谱柱与 CNLSD、CAD、C4D 或 LC-MS 相结合,这些相对新技术在研究和发现领域的应用越来越多。该方法可用于测定蛋白质(多肽)药物或其他生物制剂的氨基酸组成和含量,测定蛋白质的一级或二级结构,并可定量测定游离氨基酸。

Aimsmass 氨基酸组成分析原理示意图

服务优势

经验丰富

具有多年的蛋白分析项目经验,以及各种成功案例,服务涵盖单抗、融合蛋白和多肽药物等。

设备先进

全新进口高分辨质谱和液相色谱设备,分析更准确更可靠。

高灵敏度

质谱手段高效灵敏快捷,可检测低丰度氨基酸组分。

实验流程

步骤内容
1. 样品制备蛋白纯化、定量、冻干或浓缩
2. 酸水解6M HCl, 110C, 24h 真空封管水解
3. 衍生化OPA/FMOC 柱前衍生化处理
4. HPLC/LC-MS 分析色谱分离与定量检测
5. 数据处理氨基酸组成计算和报告
Aimsmass 氨基酸分析流程示意图

常见问题

氨基酸组成分析的原理是什么?

蛋白质经酸水解(6M HCl, 110C, 24h)将肽键完全断裂,释放出游离氨基酸。然后通过柱前衍生化(如 OPA/FMOC)后,使用 HPLC 或 LC-MS 进行分离和定量分析。不同的氨基酸根据其在色谱柱上的保留时间和特征吸收波长进行鉴定和定量。

哪些氨基酸在水解过程中容易被破坏?

色氨酸在酸水解条件下几乎完全被破坏,需要碱水解或酶解法单独测定;丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸在酸水解中有部分损失(约 10-15%);天冬酰胺和谷氨酰胺会分别转化为天冬氨酸和谷氨酸,因此报告为 Asp+Asn 和 Glu+Gln 总量。

氨基酸分析的样品要求是什么?

蛋白纯度 >95%,总量 >100 ug。需提供冻干粉或高浓度溶液(>1 mg/mL)。缓冲液中应避免含高浓度盐和氨基酸类成分(如 Tris、甘氨酸),以免干扰分析结果。

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