黄酮类代谢物定量分析概述
黄酮类化合物（Flavonoids）是一类广泛存在于植物、水果、蔬菜和茶叶中的多酚类天然产物，目前已报道超过 8000 种。根据中心杂环的氧化程度和取代基不同，黄酮类化合物可分为黄酮（flavones）、黄酮醇（flavonols）、黄烷酮（flavanones）、异黄酮（isoflavones）、花色素（anthocyanidins）和黄烷-3-醇（flavan-3-ols）等亚类。[1]
黄酮类化合物经膳食摄入后，在肠道吸收并通过血液循环分布到各组织器官。大量流行病学和实验研究表明，黄酮类化合物具有抗病毒、抗癌、心血管保护、抗炎、抗氧化等多种生物活性，是营养学和药理学研究的重要对象。[2]
Aimsmass 基于专业的 LC-MS/MS 三重四极杆质谱平台，采用 MRM 多反应监测模式和同位素内标法，可对血浆、尿液、组织、食品等多种样本中的数十种黄酮化合物进行精准绝对定量。
黄酮类代谢物定量分析的研究价值
营养流行病学研究
膳食黄酮摄入量与心血管疾病、2 型糖尿病、某些癌症的风险呈负相关。精准定量血浆/尿液中的黄酮代谢物可反映个体膳食暴露水平，为营养流行病学研究提供生物标志物。
药代动力学研究
黄酮类化合物的吸收、分布、代谢和排泄（ADME）研究是新药开发和保健品评价的基础。LC-MS/MS 绝对定量可精确追踪黄酮原型及其代谢产物在体内的动态变化。
食品质量控制
黄酮类化合物是评价食品营养价值和质量的重要指标。LC-MS/MS 多组分检测可同时定量茶叶、蜂蜜、果蔬等食品中的多种黄酮成分，支持产地溯源和品质评价。
典型检测靶标
| 化合物 | 英文名 | 亚类 | 检测方法 |
|---|---|---|---|
| 白杨素 | Chrysin | 黄酮 | LC-MS/MS (MRM) |
| 芹黄素 | Apigenin | 黄酮 | LC-MS/MS (MRM) |
| 木犀草素 | Luteolin | 黄酮 | LC-MS/MS (MRM) |
| 芸香苷 | Rutin | 黄酮醇苷 | LC-MS/MS (MRM) |
| 槲皮素 | Quercetin | 黄酮醇 | LC-MS/MS (MRM) |
| 山奈酚 | Kaempferol | 黄酮醇 | LC-MS/MS (MRM) |
* 以上为典型检测靶标，可根据需求定制扩展检测面板，涵盖 50+ 种黄酮类化合物。
技术平台
采用 Thermo Fisher TSQ Quantis / TSQ Altis 三重四极杆质谱仪，搭配 EASY-nLC 1200 液相色谱系统。MRM 多反应监测模式，负离子/正离子切换扫描，同位素内标法定量，线性范围 0.5-2000 ng/mL。
标准检测流程
样本前处理：根据样本类型采用优化的提取方案（蛋白沉淀、液液萃取或固相萃取），确保目标代谢物的回收率和稳定性。
色谱分离：选择适合目标代谢物极性的色谱柱和流动相体系，梯度洗脱实现良好分离，正/负离子切换覆盖更多化合物。
质谱检测：三重四极杆 MRM 模式，同位素内标法定量。多组分同时监测，一次进样完成所有目标物的定性和定量。
数据分析与报告：专业软件处理原始数据，内标校正定量，输出代谢物浓度表、质控报告和统计分析结果。
送样要求
| 样本类型 | 推荐送样量 | 最低送样量 |
|---|---|---|
| 血浆/血清 | 200μL | 50μL |
| 组织 | 200mg | 50mg |
| 细胞 | 2×107 个 | 5×106 个 |
| 尿液 | 1-5mL | 500μL |
| 粪便 | 200mg | 50mg |
* 样本需 -80°C 保存，干冰运输。具体要求请参考送样指南，或联系技术支持获取定制化送样方案。
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参考文献
- Tian X, et al. Chemical isotope labeling for quantitative proteomics. Mass Spectrom Rev. 2021;42(2):546-576. DOI:10.1002/mas.21709 方法学，定量
- Sivanich MK, et al. Recent advances in isobaric labeling and applications in quantitative proteomics. PROTEOMICS. 2022;22(19-20):2100256. DOI:10.1002/pmic.202100256 综述，TMT
- Louca S, et al. Advances in data-independent acquisition mass spectrometry towards comprehensive digital proteome landscape. Mass Spectrom Rev. 2023;42(6):2324-2348. DOI:10.1002/mas.21781 DIA
- Li J, et al. Data-independent acquisition (DIA): an emerging proteomics technology for analysis of drug-metabolizing enzymes. Drug Discov Today Technol. 2021;39:49-56. DOI:10.1016/j.ddtec.2021.06.006 综述
常见问题
黄酮类化合物可以同时检测多少种？
标准面板可同时检测 20-30 种常见黄酮化合物，定制面板可扩展至 50+ 种，涵盖黄酮、黄酮醇、黄烷酮、异黄酮、花色素等主要亚类。
适合哪些样本类型？
适用于血浆/血清、尿液、组织匀浆、食品提取物等多种样本。食品样本（茶叶、蜂蜜等）需适配前处理方法。
定量方法的准确性如何？
采用同位素标记内标法（如 13C 或 D 标记的黄酮标准品），可校正样品制备损失和基质效应，定量准确性高，RSD < 15%。
送样量要求是多少？
血浆/血清 200μL（最低 50μL），组织 200mg（最低 50mg），食品样本 500mg。样本需 -80°C 保存，干冰运输。
项目周期多长？
从收到合格样本到交付定量报告，常规周期为 2-3 周。包含样本前处理、LC-MS/MS 采集、定量分析和报告编制。