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AIMS 专业服务

SUMO化蛋白质组学

基于 LC-MS/MS 高通量质谱平台,系统性绘制生物样本中的SUMO化修饰景观图谱,揭示蛋白质翻译后修饰调控网络。

Thermo Fisher 高分辨质谱 LC-MS/MS 全局分析 系统性修饰景观图谱
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SUMO化概述

SUMO 化是一种可逆的蛋白翻译后修饰,经常发生在蛋白的赖氨酸残基,伴随链接着 11KDa 的泛素类似的调节短肽。最重要的是 SUMO 化还参与一系列蛋白功能,包括转录因子调控、蛋白相互作用以及蛋白亚细胞定位等[1]。

与泛素化类似,SUMO 化修饰过程需要 3 种酶的参与协助完成:SUMO-E1(activating enzyme)、SUMO-E2(conjugating enzyme)、SUMO-E3(Ubi-protein ligase)。更多研究发现蛋白发生 SUMO 化修饰可能会与人类疾病的发生发展有关,例如心血管疾病、癌症、神经退行性疾病和免疫疾病[2]。

SUMO 化修饰的酶级联反应与核质转运调控示意图

SUMO化蛋白质组学的研究价值

SUMO 化是一种由小泛素样修饰物(SUMO)共价连接到蛋白质赖氨酸残基上的可逆翻译后修饰。虽然 SUMO 与泛素在结构上高度相似,但 SUMO 化主要参与蛋白质亚细胞定位、转录调控、DNA 修复和核质运输等过程,而非蛋白质降解。[3]

SUMO 化蛋白质组学通过系统性鉴定 SUMO 修饰位点和底物蛋白,揭示 SUMO 调控的功能网络。由于 SUMO 化位点鉴定技术难度较高(需富集 SUMO 化肽段),Aimsmass 基于优化的免疫亲和富集和质谱策略,提供高灵敏度的 SUMO 化蛋白质组学服务。[4]

N 转录调控与表观遗传

SUMO 化修饰广泛参与转录因子的活性调控,如 p53、NF-κB、c-Jun 等的 SUMO 化影响其转录活性、蛋白稳定性和亚细胞定位。SUMO 化还参与异染色质形成和基因沉默的表观遗传调控。

I DNA 损伤修复

DNA 双链断裂修复中,BRCA1、53BP1、RPA 等修复蛋白的 SUMO 化修饰调控修复因子的募集和功能。SUMO 化蛋白质组学可揭示 DNA 损伤应答的 SUMO 调控网络。

C 神经退行性疾病

SUMO 化修饰在 α-突触核蛋白、亨廷顿蛋白和 Tau 等神经退行性疾病相关蛋白的聚集中发挥调控作用。SUMO 化水平的改变与帕金森病和阿尔茨海默病的病理进程密切相关。

Aimsmass 技术方案

Aimsmass 基于专业的 LC-MS/MS 质谱平台,提供 SUMO 化蛋白质组学服务,可对生物样本进行全局 SUMO 修饰定性分析。

SUMO 化修饰富集与质谱鉴定

采用 SUMO 特异性抗体或 K-ε-GG 抗体(检测 SUMO 酶切后残留的 di-Gly 标记)进行免疫亲和富集。由于 SUMO 化位点鉴定技术难度较高,Aimsmass 优化了富集和洗脱条件以提高灵敏度和鉴定深度。

SUMO化蛋白质组学定量策略对比

在全局鉴定SUMO化修饰位点的基础上,定量分析可进一步比较不同生理/病理状态下修饰水平的动态变化。Aimsmass 提供多种定量策略供选择:

对比维度Label-free 非标记定量iTRAQ/TMT 标记定量DIA 数据非依赖采集
样本通量无限制,灵活多样最多 16 个样本同时标记无限制,适合大队列
定量精度中等,需较多技术重复高,多通道内标校正高,谱图库辅助定量
成本最低,无试剂费用较高,需标记试剂中等
适用场景样本量大、预算有限的探索性研究精确比较少量样本间的修饰差异大队列临床样本、时间序列研究
推荐Aimsmass 技术团队会根据您的实验设计和样本数量推荐最优定量方案
选择方法 & 咨询报价 或拨打 021-51914748

数据交付内容

修饰位点鉴定列表

包含修饰蛋白名称、修饰位点位置、修饰肽段序列、鉴定置信度评分(FDR 控制)。

原始质谱数据

提供全部 LC-MS/MS 原始数据文件(.raw/.mzML),支持后续独立数据分析与验证。

搜库结果与质控报告

数据库搜索结果(含搜库参数说明)、质控指标汇总(肽段/蛋白 FDR、鉴定数量统计)。

增值分析(可选)

差异修饰定量分析、GO 功能注释、KEGG 通路富集、蛋白互作网络分析等生信分析报告。

Thermo
高分辨质谱平台
4-6
周常规服务周期
1%
肽段级 FDR 控制
LC-MS/MS
高通量检测

送样要求

样本类型送样量/每个样本
常规动物组织100mg
软体动物组织1g
常规植物组织1g
植物果实及种子2g-4g
细胞样本2×107
菌类样本150mg
最低蛋白质量:1mg

* 具体的样本制备和保存要求请参考送样指南,或联系技术支持获取定制化送样方案。

检测平台:Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪(分辨率 240,000 @ m/z 200,扫描速度 40 Hz),搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统 + HPLC-MS/MS

如需对特定蛋白的SUMO化修饰位点进行靶向鉴定和验证,可参考 SUMO化位点鉴定技术服务。

开启您的SUMO化组学研究

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相关蛋白质组学服务

  1. Yang W, Paschen W. SUMO proteomics to decipher the SUMO-modified proteome regulated by various diseases. Proteomics. 2014;15(5-6):1181-1191. DOI:10.1002/pmic.201400298 SUMO 化
  2. Sheng Z, Wang X, Ma Y, et al. MS-based strategies for identification of protein SUMOylation modification. Electrophoresis. 2019;40(21):2877-2887. DOI:10.1002/elps.201900100 方法学
  3. Osula O, Swatkoski S, Cotter RJ. Identification of protein SUMOylation sites by mass spectrometry using combined microwave-assisted aspartic acid cleavage and tryptic digestion. J Mass Spectrom. 2012;47(5):644-654. DOI:10.1002/jms.2959 技术进展

常见问题

SUMO化蛋白质组学服务有什么优势?

操作容易简单,不需同位素标记,实验流程简单。高精度与准确性,可全局绘制修饰景观图谱,采用 Thermo Fisher Orbitrap Exploris 480 / Q Exactive HF-X 高分辨质谱仪(分辨率 240,000 @ m/z 200,扫描速度 40 Hz),搭配 EASY-nLC 1200 纳升液相色谱系统,获取更多肽段信息,找到更多修饰位点。检测范围广,可系统性绘制各种细胞或组织中SUMO化修饰景观图谱。

样本送样要求是什么?

常规动物组织 100mg,软体动物组织 1g,常规植物组织 1g,植物果实及种子 2g-4g,细胞样本 2×107 个,菌类样本 150mg,最低蛋白质量 1mg。具体的样本制备和保存要求请参考送样指南。

SUMO化蛋白质组学服务周期一般多长?

常规服务周期为 4-6 周,包含样本前处理、修饰富集、LC-MS/MS 检测和数据分析全流程。如样本量较大或有特殊需求(如多组学联用),周期可能适当延长。具体时间安排可在咨询时与 Aimsmass 技术团队确认。

交付的数据包含哪些内容?

标准交付内容包括:SUMO化修饰位点鉴定列表(含修饰蛋白名称、位点位置、肽段序列、FDR 评分)、LC-MS/MS 原始数据文件(.raw/.mzML)、搜库结果与质控报告(含搜库参数和鉴定统计)。可选增值服务包括差异修饰定量分析、GO 功能注释、KEGG 通路富集等生信分析报告。

组学发现后如何验证目标SUMO化位点?

Aimsmass 提供配套的SUMO化位点鉴定技术服务和验证试剂盒,可通过 Western Blot、定点突变和功能实验对组学发现的目标位点进行独立验证,形成"组学发现 → 靶向验证"的完整研究闭环。

一次实验能鉴定多少SUMO化修饰位点?

鉴定数量取决于样本类型、蛋白复杂度和修饰丰度。一般情况下,单次实验可鉴定数百至数千个SUMO化修饰位点。采用高深度分级分离策略可进一步提高鉴定覆盖度。Aimsmass 技术团队会根据研究目标推荐最优方案。

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